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  • 人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW32260
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫存:100
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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 :人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :腦組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦組織。大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì)) 覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3) 、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積) 。半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積。大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。

由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種,相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細(xì)胞,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(C N S) 中的第一道也是最主要的一道免疫防線。
小膠質(zhì)細(xì)胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的20% ,小膠質(zhì)細(xì)胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和神經(jīng)病理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機(jī)理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。

但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細(xì)胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源,如腫瘤壞死因子(T N F) ,一氧化氮,白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。
神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能:
① 神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中。
② 當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí),或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時(shí),神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞。
③ 膠質(zhì)細(xì)胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達(dá)C D -4陽性T細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原,能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。

方法簡介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法,在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細(xì)胞制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)C D 11b免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :梭形、多角形
傳代特性 :屬于終末分化細(xì)胞。屬于不增殖細(xì)胞群
傳代比例 :不傳代
消 化  液 :利多卡因(12m M ) 
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

使用方法
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈梭形、多角形,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞屬于終末分化細(xì)胞。屬于不增殖細(xì)胞群。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 特殊細(xì)胞消化一
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加利多卡因(12m M ) 消化液1m L至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,37℃溫浴3min(不能超過5min) 。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5m l完全培養(yǎng)基稀釋消化液。
3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞,吸出細(xì)胞懸液,經(jīng)1200rpm 離心5min,丟棄上清。
4) 用完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù)接種于相應(yīng)實(shí)驗(yàn)器具內(nèi),待細(xì)胞完全貼壁后開始試驗(yàn)(預(yù)計(jì)2h 貼壁,12-24h 完全展開) 。
5) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 特殊細(xì)胞消化二
1) 若細(xì)胞無法消化,更換消化液為0. 25% 胰蛋白酶,按照上述消化一方案操作。
2) 若仍然無法消化,加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化,采用無菌細(xì)胞刮,直接刮取細(xì)胞(此法不推薦,最后選擇,會造成細(xì)胞機(jī)械損傷死亡) 。

注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。