產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 : Psi2DAP
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 : 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 : DM EM (PM 150210)+10% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 : 2~ 3分鐘
傳代比例(密度) : 1:3-1:4
換液頻次 : 2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
Psi2 D A P細(xì)胞生成一種可以感染小鼠細(xì)胞的載體。Psi2D AP細(xì)胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和新霉素抗性基因,Psi2 D A P細(xì)胞通過Psi2細(xì)胞插入一個重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒(D A P)基因組衍生而來。被這種Psi2 D A P細(xì)胞產(chǎn)生的載體感染的細(xì)胞表達的磷酸酯酶可用組織化學(xué)方法檢測,可以用作體內(nèi)追蹤它們命運的標(biāo)記;Psi2 D A P細(xì)胞也可能產(chǎn)生輔助病毒。
供體年齡 : 胎兒
組織來源 : 正常胚胎
細(xì)胞類型 : 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級 : 1
基因表達 : ahum an placen talalkaline phosphatase transducing vector
細(xì)胞保藏中心 : ATCC ; C R L-1949
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?xì)胞有疑問,請及時跟我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)??筛覀兊募夹g(shù)支持交流。