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RKO-AS45-1人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞
細胞簡稱 ：RKO -A S45-1
細胞別稱 ：RKO -A S-45-1;RKO AS451;RKO _AS45
細胞形態(tài) ：上皮細胞樣
生長特性 ：貼壁細胞
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ：M EM （含N EA A ）(PM 150410)＋10% F B S(164210-50)＋1%P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液。
6、收集細胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 ：2~ 3分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:3-1:4
細胞背景描述
人的cD N A 中編碼G A D D 45的開放閱讀框克隆到表達載體pC M V.3中，轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細胞RK O ，建立了RK O -A S45-1細胞株。RK O -A S45-1細胞含有穩(wěn)定整合巨細胞病毒(C M V )啟動子的表達載體，RK O -A S45-1細胞系和它的母系RK O 一起可用于G A D D 45對D N A 修復、凋亡和藥物敏感性研究。
組織來源 ：結(jié)腸癌，整合起動G A D D 45a表達載體的C M V 啟動子
細胞類型 ：腫瘤細胞
腫瘤類型 ：腸癌細胞
基因表達 ：p53+ (u n d erexp ressed )
生物安全等級 ：2[CellsC ontainCM V viralseq u en ces]
細胞保藏中心 ：ATCC；C R L-2579
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養(yǎng)詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對細胞有疑問，請及時跟我們聯(lián)系；對于細胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
