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021-54845833/15800441009
產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增不動(dòng)桿菌屬通用，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分：
編號
成分
規(guī)格
試劑一
PCR MagicMix 3.0
1mL（紅蓋）
試劑二
超純水
1mL（亮黃色）
試劑三
不動(dòng)桿菌屬通用PCR引物混合液
100μL（白蓋）
試劑四
不動(dòng)桿菌屬通用PCR陽性對照（1×10E8 /μL）
50μL（黃蓋）
試劑五
使用手冊
1 份
運(yùn)輸及保存：
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品 DNA。
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容?？梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加10μL不動(dòng)桿菌屬通用PCR陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)：
3. 對N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽性對照和一個(gè)PCR陰性對照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：
|
成份 |
N+2個(gè)樣品管 |
PCR陰性對照 |
PCR陽性對照 |
|
PCR Magic Mix 3.0 |
各20μL |
20μL |
20μL |
|
不動(dòng)桿菌屬通用PCR引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
|
N+2個(gè)樣品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
|
PCR陰性對照（水） |
-- |
18μL |
-- |
|
PCR陽性對照（不動(dòng)桿菌屬通用PCR陽性對照1000倍稀釋液） |
-- |
-- |
18μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：
過程
溫度
時(shí)間
預(yù)變性
95℃
5 min
PCR 反應(yīng)35個(gè)循環(huán)
95℃
30 sec
55℃
30 sec
72℃
40 sec
最后延伸
72℃
7 min
三、電泳檢測：
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示：
本公司的所有產(chǎn)品，僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
