測(cè)定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個(gè)月
測(cè)定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
土壤磷酸二酯酶(S-PDE,EC 3.1.4.1)是在土壤磷酸單酯酶之后的的第二大磷酸酶。其在土壤有機(jī)磷的循環(huán)代謝中起到重要作用。本試劑盒提供一種簡(jiǎn)單、靈敏、快速的的檢測(cè)方法。土壤磷酸二酯酶(S-PDE)催化雙(4-硝基苯)磷酸酯 (BNPP)生成黃色的產(chǎn)物 PNP,該產(chǎn)物在 405nm 處有最大吸收峰。通過檢測(cè) PNP 在 405nm 下的增加速率,即可得到 S-PDE 酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋或恒溫培養(yǎng)箱、天平、可調(diào)式移液器。
土壤磷酸二酯酶(S-PDE)活性測(cè)定:
1、樣本制備:
取新鮮土樣或干土(風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干),先粗研磨,過 40 目篩網(wǎng)備用。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(10μmol/mL):向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1.4mL 蒸餾水超聲溶解,
若有結(jié)晶析出,需 37℃水浴至完全溶解。
2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 2, 4, 6, 8, 10 μmol/ml。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 在 EP 管中直接加入:10μL 標(biāo)準(zhǔn)品+590μL 試劑一+400μL 試劑三,混勻,立即全部上清液至 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中,立即于 405nm 下讀取吸光值 A。
4. 根據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。