6-磷酸葡萄糖胺合成酶(GlmS)/6-磷酸果糖谷氨酰胺氨基轉(zhuǎn)移酶(GFAT)試劑盒分光法/24樣
測定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
6-磷酸葡萄糖胺合成酶(GlmS,EC 2.6.1.16)又名 6-磷酸果糖谷氨酰胺氨基轉(zhuǎn)移酶(GFAT),是氨基己糖合成代謝途徑中第一步反應(yīng)的催化酶,也是限速酶,該代謝途徑的最終產(chǎn)物鳥苷氮乙酰葡萄糖胺是生命體糖蛋白的前體和一些真菌細(xì)胞壁主要成分幾丁質(zhì)的合成單體。6-磷酸葡萄糖胺合成酶(GlmS)催化谷氨酰胺和 6-磷酸果糖合成 6-磷酸葡萄糖胺和谷氨酸,本試劑盒通過檢測生成谷氨酸的速率進(jìn)而計(jì)算得出該酶活性的大小。
反應(yīng)方程:L-glutamine + D-fructose 6-phosphate = L-glutamate + D-glucosamine 6-phosphate。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
6-磷酸葡萄糖胺合成酶活性檢測:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(10μmol/mL):標(biāo)準(zhǔn)品用 2mL 的蒸餾水溶解。(母液需在兩天內(nèi)用且-20℃保存)。
2. 把母液稀釋成六個梯度標(biāo)準(zhǔn)品:0,0.02,0.04,0.06,0.08,0.1. μmol/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整濃度。
3. 依據(jù)顯色反應(yīng)階段,測定管的加樣表操作,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。