測定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個(gè)月
測定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產(chǎn)品簡介:
乙酰乳酸合成酶( ALS,EC 2.2.1.6) 是支鏈氨基酸生物合成途徑中的一個(gè)關(guān)鍵酶,此生物合成過程只存在于植物和微生物體內(nèi),是綠色除草劑的重要作用靶標(biāo)。乙酰乳酸合成酶( ALS)可催化 2 分子的丙酮酸生成乙酰乳酸,該產(chǎn)物在硫酸作用下脫羧
生成乙酰甲基甲醇,該產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)生成有色物質(zhì),該有色物質(zhì)在 525nm 處有特征吸收峰,通過檢測該有色物質(zhì)的增加速率即可得出 ALS 酶活性大小。
反應(yīng)方程式:2 pyruvate =2-acetolactate+CO2。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、蒸餾水。
乙酰乳酸合成酶(ALS)活性測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(1mg/mL):向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水混勻溶解。
2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0,0.01,0.02,0.03,0.04,0.05 mg/mL。也
可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 依據(jù)對照管的加樣表操作,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)品乙酰甲基甲醇的摩爾質(zhì)量為 88.11。