Y2HGold菌株

名 稱

Y2HGold菌株

貨 號(hào)

TW-CC3485

品 牌

通蔚生物

細(xì)胞規(guī)格

100μl

抗性

無抗

培養(yǎng)基

YPDA

菌株類別

酵母菌

培養(yǎng)條件

28℃，有氧，YPDA

基因型

MATa,trp1-901,leu2-3,112,ura3-52,his3-200,gal4Δ,gal80Δ,LYS2::

GAL1UAS–Gal1TATA–His3,GAL2UAS–Gal2TATA–Ade2URA3: :

MEL1UAS–Mel1TATAAUR1-C MEL1

質(zhì)粒轉(zhuǎn)化

電轉(zhuǎn)

保存方式

30%甘油，-20℃

基本應(yīng)用

用于酵母雙雜交

菌株簡(jiǎn)介

Y2HGold菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實(shí)驗(yàn)用菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?；蚺cMATα型酵母菌株Y187通過mating操作進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫試驗(yàn)。Transformation  marker為: trp1, leu2，報(bào)告基因?yàn)椋篈bAr, HIS3, ADE2, MEL1。Y2HGold -GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。質(zhì)粒PGBKT7的篩選標(biāo)志為TRP1，用于表達(dá)DNA-BD(來自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白；質(zhì)粒PGADT7的篩選標(biāo)志為L(zhǎng)EU，用于表達(dá)AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)與目標(biāo)蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4系統(tǒng)原理：一個(gè)完整的酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4可分為功能上相互獨(dú)立的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：位于N端1 ~ 174位氨基酸區(qū)段的DNA結(jié)合域（DNA-BD）和位于C端768 ~881 位氨基酸區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識(shí)別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并與之結(jié)合。而AD可以啟動(dòng)UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。BD和AD單獨(dú)存在不能激活轉(zhuǎn)錄，但當(dāng)二者接近時(shí)，則呈現(xiàn)完整的GAL4活性，使含有UAS的啟動(dòng)子下游基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。正常條件下，BD不與AD結(jié)合，將要檢測(cè)的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合，形成 bait 融合蛋白（bait -BD）和 prey 融合蛋白（prey-AD），如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用，就會(huì)促使 BD 和 AD 的相互接近，形成完整的GAL4，從而激活報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。Y2HGold有四個(gè)報(bào)告基因：AbAr, HIS3, ADE2, MEL1，分別由三種不同的啟動(dòng)子（G1，G2，M1）啟動(dòng)，這三種啟動(dòng)子只有GAL4識(shí)別的17bp核心區(qū)相同，其余部分均不同，大大降低了酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率。此外新報(bào)告基因AbAr與以前的營(yíng)養(yǎng)缺陷報(bào)告基因相比具有更低背景的優(yōu)點(diǎn)，也可以降低酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率。

供應(yīng)范圍

僅供限于科研實(shí)驗(yàn)研究

運(yùn)輸方式

低溫快遞運(yùn)輸

菌株優(yōu)勢(shì)

通蔚生物菌株庫擁有200種菌株 , 遺傳性狀一致

特別說明

細(xì)胞購買/細(xì)胞培養(yǎng)/動(dòng)物血清/實(shí)驗(yàn)服務(wù)/原代提取/菌株購買，請(qǐng)立即與通蔚生物聯(lián)系

售后服務(wù)

細(xì)胞予重發(fā)

1.細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。

2.收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。

3.收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

6.細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。

細(xì)胞不予重發(fā)

1.客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)。

2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。

3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。

4.細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。

5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。

6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的，不重發(fā)。

特別說明

上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打免費(fèi)服務(wù)電話021-54845833/15800441009，我們隨時(shí)給予實(shí)驗(yàn)中的免費(fèi)解答。