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品質(zhì)保證 · 通蔚試劑

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  • 科研人肌聚糖 Delta (SGCd) ELISA試劑盒

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW00807H
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨供應(yīng)
    • 商品庫(kù)存:100
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肌聚糖Delta (SGCd) 酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定樣本中肌聚糖Delta (SGCd) 的含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定標(biāo)本中肌聚糖Delta (SGCd) 水平。用純化的肌聚糖Delta (SGCd) 抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入肌聚糖Delta (SGCd) ,和HRP標(biāo)記的肌聚糖Delta (SGCd) 抗原,使它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的肌聚糖Delta (SGCd) 的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中肌聚糖Delta (SGCd) 的含量。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品S140ng/mL

0.5ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

標(biāo)準(zhǔn)品S220ng/mL

0.5ml×1

3

酶標(biāo)包被板

12×8

標(biāo)準(zhǔn)品S310ng/mL

0.5ml×1

4

顯色劑A

6ml×1

標(biāo)準(zhǔn)品S45ng/mL

0.5ml×1

5

顯色劑B

6ml×1

標(biāo)準(zhǔn)品S52.5ng/mL

0.5ml×1

6

終止液

6ml×1/

9

說(shuō)明書(shū)

1

7

樣品稀釋液

6ml×1/

10

封板膜

2

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本處理:
(1)水樣   采集后經(jīng) -20℃反復(fù)凍融三次,再經(jīng)玻璃纖維過(guò)濾后,備查
(2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相關(guān)文獻(xiàn)提取進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,備查
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加50微升,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
2.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
檢測(cè)范圍:
1ng/mL - 50ng/mL
規(guī)格:
96份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月