PCR 和 qPCR 有什么區(qū)別？qPCR：實時定量 PCR 技術(shù)

  PCR和qPCR有什么區(qū)別？PCR可以實現(xiàn)DNA片斷擴增，而qPCR具有實時定量擴增的 DNA 片段，這就意味著qPCR 不僅可以告訴你某個 DNA 片段是否存在，還可以告訴你它的數(shù)量有多少。如果您還不了解，沒關(guān)系，接下來上海通蔚將這些分子生物學概念更加巨像化，便于您的理解。

  什么是PCR？

  PCR（聚合酶鏈式反應）是一種實驗室技術(shù)，由KaryMullis在20世紀80年代開發(fā)，如今用于從少量DNA產(chǎn)生大量DNA。

  PCR通常是其他過程中使用的步驟，例如DNA測序、病原體檢測和凝膠電泳。PCR是一種重要的診斷技術(shù)，常用于病毒學、微生物學、寄生蟲學、真菌學和牙科等領域。

  聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于制備DNA特定片段的多個副本的方法。這個過程從少量模板DNA開始，然后通過稱為聚合酶的酶進行復制。通過重復加熱和冷卻循環(huán)可以增加復制的數(shù)量，這會分離DNA鏈，以便它們可以再次復制。

  PCR的最終產(chǎn)物是目標DNA序列的大量相同副本。然后該產(chǎn)品可用于進一步分析，例如測序或Southern印跡。PCR還可用于從mRNA模板分子制備cDNA。

  什么是qPCR？

  定量聚合酶鏈式反應（qPCR或定量PCR）與PCR非常相似，但它還允許您量化樣品中存在的目標DNA的量。qPCR涉及在擴增過程中添加與目標DNA結(jié)合的熒光染料或探針。當這些探針被激光激發(fā)時，它們會發(fā)出不同波長的光。

  通過測量每個波長發(fā)出的光，您可以確定在擴增開始之前樣品中存在多少目標DNA。qPCR還可用于通過測量熒光隨時間的增加來實時監(jiān)測擴增進度。

  PCR和qPCR之間的差異

  PCR和qPCR之間的主要區(qū)別在于qPCR是實時方法，而PCR不是。這意味著通過qPCR，您可以實時監(jiān)控目標DNA的擴增情況。

  兩種方法之間的另一個區(qū)別是qPCR需要使用熒光染料或探針，而PCR則不需要。這些探針可讓您定量樣品中存在的目標DNA的量。

  PCR通常用于擴增DNA以進行測序或其他下游應用。

  qPCR通常用于檢測和定量RNA病毒。

  PCR和qPCR的應用和用途

  聚合酶鏈式反應

  PCR是一個相對簡單的過程，可以檢測DNA是否存在。PCR應用于許多不同的領域，包括法醫(yī)學、醫(yī)學和生物技術(shù)。它經(jīng)常用于擴增小片段DNA以進行測序或其他下游應用。

  PCR還可用于從mRNA模板分子制備cDNA。

  定量PCR

  qPCR提供測量反應速率的實時數(shù)據(jù)，提供有關(guān)任何給定時間樣本中存在的DNA數(shù)量的信息，本質(zhì)上，它能夠測量基因表達速率。

  在分子生物學中，這有助于理解蛋白質(zhì)合成，從而有助于理解健康和疾病的生物途徑。實時或qPCR可用于檢測基因表達、病原體和RNA的存在和數(shù)量，以及驗證DNA微陣列結(jié)果和環(huán)境應用。

  qPCR具有高通量和更寬的動態(tài)范圍的優(yōu)點，因為它可以在同一孔內(nèi)檢測廣泛的表達水平。由于其多重功能，可以在同一實驗中擴增多個目標、高通量和快速結(jié)果，因此運行起來更加經(jīng)濟。

  用于PCR和qPCR的設備

  有許多不同類型的設備可用于PCR和qPCR。最常見的設備類型是熱循環(huán)儀，它用于加熱和冷卻樣品以使DNA擴增發(fā)生。

  其他常見類型的設備包括逆轉(zhuǎn)錄酶、熒光染料或探針以及激光器。根據(jù)您的具體應用，您可能還需要其他類型的設備。

  PCR和qPCR是許多不同領域中使用的重要方法。通過了解它們之間的主要區(qū)別，您可以為您的特定應用選擇合適的方法。

  PCR和qPCR區(qū)別通蔚給大家介紹到這里。其實PCR和qPCR區(qū)別就在于qPCR 通過使用熒光染料或探針來實現(xiàn)實時監(jiān)測和定量。簡單來說，qPCR 在 PCR 的基礎上增加了一個“計數(shù)器”，可以更精確地測量 DNA 擴增的數(shù)量。其實它們之間擴增原理和實驗流程差別不大。也希望您通過學習和了解，在今后的PCR實驗中增加更多樂趣和成果。